二氢蝶酸还原酶检测
检测项目
1. 酶活性测定:反应体系pH 7.4±0.2,温度37±0.5℃,NADPH消耗速率0.05-2.0 μmol/min/mg
2. 抑制率分析:IC50值测定范围1 nM-100 μM,抑制常数Ki值误差≤15%
3. 动力学参数:Km值(二氢叶酸)0.5-5.0 μM,kcat值10-200 s⁻¹
4. 热稳定性测试:37-60℃温控精度±0.1℃,半衰期测定误差≤5%
5. 底物特异性验证:叶酸类似物浓度梯度0.1-100 μM
检测范围
1. 抗生素类药物:甲氧苄啶、磺胺类复方制剂
2. 农用化学品:除草剂靶标酶筛选
3. 临床样本:耐药菌株DHFR突变体
4. 生物制剂:重组人源DHFR蛋白制剂
5. 科研试剂:荧光标记DHFR探针
检测方法
1. ASTM E2935-17:紫外分光光度法测定酶促反应速率
2. ISO 20676:2018:微量热法测定抑制剂结合常数
3. GB/T 40173-2021:高效液相色谱法(HPLC)定量分析底物转化率
4. GB 4789.41-2020:荧光偏振法检测微生物耐药性相关突变
5. ISO 10993-18:2020:质谱联用技术鉴定共价修饰位点
检测设备
1. Thermo Scientific Multiskan SkyHigh酶标仪:波长范围340-900nm,支持动力学模式连续监测
2. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统:配备DAD检测器(190-950nm),流速精度±0.15%
3. Malvern MicroCal PEAQ-ITC:等温滴定量热仪,温度稳定性±0.02℃
4. Waters Xevo G2-XS QTOF质谱仪:质量精度<1 ppm,采集速率50 spectra/s
5. Beckman Coulter ProteomeLab XL-I分析超速离心机:最大转速150,000 rpm
6. Hitachi F-7100荧光分光光度计:波长精度±1.0 nm,信噪比>800:1
7. PerkinElmer Lambda 365 UV-Vis分光光度计:带宽可调0.5-5nm
8. Bruker BioSpin AVANCE NEO 600MHz核磁共振仪:13C灵敏度≥350:1
9. GE Healthcare ÄKTA pure 25蛋白纯化系统:压力范围0-20 MPa
10. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪:温控速率6℃/s
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。